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密理博超濾管如何使用?使用過程又需要注意哪些事項(xiàng)?

更新時(shí)間:2023-06-28 瀏覽次數(shù):638

  密理博超濾管具有快速超濾功能,能夠達(dá)到較高的濃縮倍數(shù),輕松實(shí)現(xiàn)從稀釋和復(fù)雜的混和樣本中濃縮回收目的產(chǎn)物。垂直設(shè)計(jì)的超濾膜以及較大的有效濾膜表面積有助于快速的樣本處理,獲得較高樣本回收率(通常>90%),并達(dá)到30倍的濃縮。

  根據(jù)標(biāo)稱分子量限值(NMWL)的不同,典型處理時(shí)間為10-30分鐘。超濾膜的垂直設(shè)計(jì)也較大程度降低了溶質(zhì)極化造成的濾膜結(jié)垢;死體積設(shè)計(jì)能有效防止過度離心使樣本干掉而造成樣本損失。收集濾出液后,濃縮樣本(截留部分)可通過一個(gè)簡便的倒置(上下反轉(zhuǎn))離心步驟而實(shí)現(xiàn)高效回收。超濾管未經(jīng)消毒,僅供一次使用。 

  密理博超濾管的應(yīng)用:
  1.濃縮或純化生物樣本。
  2.純化組織培養(yǎng)提取液或細(xì)胞裂解液中的大分子成分,去除反應(yīng)液中的引物、接頭或分子標(biāo)記,在HPLC前去除蛋白質(zhì)。
  3.除鹽,緩沖液更換,或滲濾。

 

  密理博超濾管使用:
  1.預(yù)處理:新超濾管:使用前用純水浸泡,冰箱預(yù)冷10min。然后將水倒出,置于冰上預(yù)冷2-5min,加樣;
  舊超濾管:倒出管內(nèi)的乙醇浸泡液,用純水沖洗干凈10遍(注意水流速盡量平緩,防止沖破濾膜),置于冰上預(yù)冷2-5min,加樣。
  2.加樣:如超濾管中有少許殘留水可將內(nèi)管倒置1000×g離心1min,移液槍移取適量樣本加入超濾管中。
  3.離心:配平,12000×g離心(15-30min),等達(dá)到目的轉(zhuǎn)速后方可離開。
  4.樣本收集:外管濾液為除去部分蛋白的樣本上清,如需取濃縮后樣本用于其他實(shí)驗(yàn),則另取外管,內(nèi)管倒置,1000×g離心1-2min。
  5.清洗:使用完的超濾管用純水反復(fù)清洗5次,再用75%乙醇沖洗3次。

  注意事項(xiàng):
  1.其最大離心力不能超過12000g,否則會導(dǎo)致濾膜破損;
  2.超濾樣本會損失五分之一至二分之一的樣本量,主要取決于樣本中蛋白含量;
  3.若管底有可見的蛋白沉淀,可以先加入純水,然后用槍頭吹打,注意不要碰到膜,吹打至沉淀懸起,然后倒掉,不可用自來水猛沖;
  4.內(nèi)管不能用烘箱進(jìn)行烘干。
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